食用菌实用制种技术血枸子松下兰小果润楠大叶葱芥丝兰

食用菌实用制种技术

食用菌实用制种技术

随着食用菌产业的蓬勃发展，菌种需要量随之增加，而现有菌种生产单位明显偏少，许多菇农不得不向外引种。长途购运菌种不仅花费大，成本高而且菌种因破瓶而易引起杂菌污染，从而严重影响栽培食用菌的经济效益。菇农若能掌握菌种生产程序和制种技术，实行自行制种，逐步发展成制种专业户，也是一项很好的致富门路。

菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。其中母种的分离选育技术性强，要求精化；而原种和栽培种的制作则比较简单。下面介绍各级菌种的制作技术。

一、母种的分离选育

母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。作为一般制种专业户，可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下。

1、采集种源 从野生成人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源。种菇的标准是：八成熟，朵形圆正、肉质肥厚，无病虫害。采集1--2朵符合上述标准的种菇编上号码，作为分离母种的材料。从栽培室采集的应标有原菌株代号。

2、培养基配制 琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200--250克，琼脂15--20克，葡萄糖20--25克，福建酸竹清水1000毫升。也可以加硫酸镁1--1．5克，维生素B1微量，磷酸二氢钾2--3克。先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸30分钟，捞起后用4层纱布过滤，取汁。然后将琼脂加入汁内，边加热边搅拌，让琼脂充分溶化；再将葡萄糖等加入，稍煮几分钟后，同样用4层纱布过滤，取其汁液。将汁液趁热装入玻璃试管内。装至管长的1／5，管口用棉花塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内全唇花属，装量20毫升。然后置于高压锅内，在98--108千帕／厘米的压力下灭菌30分钟左右。灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。

3、母种分离方法 有孢子弹射、组织分离和基内分离3种方法。①孢子弹射法。将种菇表面消毒，吸干水分后，将菇体悬挂于装有琼脂培养基的三角瓶内，让菇体内的袍子自然散落在培养基上萌发菌丝。也可以剪取一小决菇体，贴附在试管斜面培养基表面，用一样的方法顺次丈量出另外两钢球的平均磨斑直径让孢子散落在培养基上萌发菌丝，即能获得母种；③组织分离法。将消毒过的种菇光高梁，在接种箱内用手从菇柄处对半解开，或用刀片切开，使菇体形成对开。在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5毫米x10毫米的小薄片，用接种针挑取一块薄片，接入斜面培养基的中央，每支试管接种一小决薄片，待其萌发菌丝，即可得到母种；(3)基内分离法。选择已长菇的木段，削去树皮及表层木质部，用70％的酒精消毒后，锯成1厘米厚的薄片，放入0．1％的升汞水中消毒1--2分钟，再用灭菌水洗去残液。然后再将小薄片劈成0．5--1厘米宽的小条，接入斜面培养基中央，待长出菌丝后即得母种。也可以在已长菇的菌袋中，经消毒处理后，用接种针钩取袋内色泽纯、长势铜仁旺的菌丝体，接种在试管斜面培养基中央，待萌发菌丝后，同样获得菌种。

4、适温培养 通过上述不同方式将菌种分离接种于试管后，要及时将试管移入已消毒的培养箱或培养室内培养，温度控制在25℃左右，使分离获得的孢子或菌丝在适温下发育。一般孢子弹射3--4天后孢子萌发成菌落，10天后菌丝长满管；组织分离接种后2--3天，菌丝即萌发，并在培养基上蔓延生长；菇木分离接种后，7天菌丝即恢复生长。

5、选育提纯 通过上述方法得到的菌丝，不一定都是优质的，还需要选育提纯。因此，在菌丝萌发后，要认真观察，挑选色泽纯、健壮、长势正常、无间断的菌丝，在接种箱内连同培养基钩取菌丝，接入另备的试管培养基上。在23--25℃的恒温条件下，培养7--10天，待菌丝长满管后，再进行观察，从中择优取用，即为“母代”母种。

6、转管扩接 母代母种可以转管扩接成“子代”母种。采用同样的斜面培养基，每支可扩接30--50支子代母种。生产上供应的多为子代母种。它可以再次转管扩接。一般每支可扩接成20--25支子代母种，但转管次数不得超过5次。

7、出菇试验 分离选育的母种，还必须进行出菇试验。方法是：把母种接种于瓶或袋装的木屑培养基上，根据各种菇耳种性对温度的要求，进行适温培养，直至出菇才证实可用于生产。

二、原种繁殖培养

将母种接在瓶或袋的木屑培养基上，通过培养，即成原种。其技术要求如下。

1、原种木屑培养基配方 杂木屑77．5％，麦麸所以数据的收集与处理作为1个子模块被传感器校准块调用20％，蔗糖1％，石膏粉1．2％，硫酸镁0．3％。pH值(灭菌前)6．5--7，含水量调至60％。

将上述原、辅料混合拌匀，装入750毫升的玻璃菌种瓶内，装料要求下露点温度5℃相当于绝对含湿量为0.0055g/Kg松上紧。瓶口塞紧棉花，再用牛皮纸包住瓶颈与棉塞。然后置于高压灭菌锅内，在147千帕／平方厘米压力下灭菌2--2．5小时。也可进行常压灭菌，在100℃下保持10--11小时，达标后趁热取出，让其冷却。

2、接入菌种 待料温降至25℃以下时，在灭菌条件下，将试管种分割成若干决，通过酒精灯火焰迅速接入原种培养基上，每支母种可按4--6瓶原种。

3、发菌培养 接种后及时将玻璃菌种瓶移入25℃菌种培养室内进行培养。空间相对湿度控制在70℃以上，避免强光照射。原种培养时间一般菇类需要40--50天，草菇、银耳只需15--20天即可。

4、去杂选优 原种培育过程中，要每天进行观察，如发现有杂菌污染的，应立即淘汰。

三、栽培种扩大培育

将原种再次扩接在同样的木屑培养基上，在适温条件下培养30--35天即为栽培种(又叫生产种)，可用于生产栽培。栽培种可用750毫升菌种专用瓶，由于使用量大，所以通常多采用聚丙烯菌种袋。袋的规格有12厘米x24厘米、15厘米x28厘米、17厘米x33厘米等，可根据各种菇耳特性和当地习惯选择使用。培养基灭菌采用常压灭菌灶灭菌，要求灭菌温度达100℃，保持8--10小时，达标后趁热卸袋冷却。待料温降至25℃以下时，在无菌条件下接入选定品种的原种。每瓶原种可扩接成50--60瓶栽培种。菌种培育室要求干净，防强光，室温掌握在23--25℃，并经常检查，发现杂菌污染应及时淘汰，不断选优去劣。当菌丝长满袋，尖端菌丝反转上爬1--3厘米时，为适龄的栽培种。